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产品编号:QR1001 包装量: 100 U
制品内容
Qizyme HiFi DNA Polymerase (2 U / µl) 50 µl
5× Qizyme HiFi Reaction Buffer 1 ml
dNTP Mixture(10 mM) 100 µl
产品简介
Qizyme HiFi DNA Polymerase是一种超保真DNA聚合酶, 该酶具有优越的可靠性和高特异性, 适合扩增长链DNA,并且显著地减少PCR延伸时间。通过改良提高了持续合成能力和PCR扩增速率,结合该酶的3’-5’核酸外切酶活性使得其保真性是普通Taq酶的50倍。而该酶的独特结构使其即便在有PCR抑制剂存在的情况下,也能快速有效的得到目的产物。该酶PCR扩增产物为平末端。
贮存溶液
20 mM Tris-HCl(pH7.4 @ 25°C),100 mM KCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,稳定剂,50% 甘油。
保存: -20 °C
优势
1)保真度高:确保PCR复制的精确程度
2)快速:延伸时间短(15-30秒/ kb)
3)方便:功能强劲,只需最少的优化
4)高产量:用更少的酶,获得更高的产量
用途
1)高保真PCR
2)快速菌落PCR
3)高通量PCR
4)克隆
PCR产物
使用Qizyme HiFi DNA Polymerase扩增的产物为平末端,如果产物用于克隆,建议使用平末端连接。如果需
要进行T / A克隆, 在加A之前需要纯化DNA, 引入Qizyme HiFi DNA Polymerase会降解产生的突出端。
反应条件
50 µl反应体系中含有:1× Reaction Buffer,DNA模板,0.2 µM上游引物,0.2 µM下游引物,0.2 mM dNTP,1 U Qizyme HiFi DNA Polymerase。
单位定义
一个单位 Qizyme HiFi DNA聚合酶可在 74 °C,在 30 分钟内向不溶于酸材料中掺入 10 nmol脱氧核糖核苷酸。
PCR反应液组成 (Total 50 µl)
组分 |
使用量 |
终浓度 |
Qizyme HiFi DNA Polymerase |
0.5 µl |
1.0 U / 50 µl |
Primer1(10 µM) |
1 µl |
0.2 µM |
Primer2(10 µM) |
1 µl |
0.2 µM |
DNA |
<250 ng |
<250 ng |
dNTPs (10mM) |
1 µl |
200 µM |
5× Qizyme HiFi Reaction Buffer |
10 µl |
1 × |
ddH2O |
Up to 50 µl |
|
注意:PCR反应建立后,将反应物上下颠倒混匀,短暂离心将液体收集到管底。如果使用的PCR循环仪没有加热盖,可在样品上覆盖矿物油。PCR反应条件 (举例)
循环步骤 |
温度 |
时间 |
预变性 |
98 °C |
30 s |
25-35 Cycles |
98 °C |
10 s |
终延伸 |
72 °C |
5-10 min |
保存 |
4-10 °C |
|