一、原理简介 百泰克独特配方的植物 DNA 抽提液（添加多种针对植物特点的多糖、多酚 去除成份）迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，只需一步离心即可去除多糖、多 酚和蛋白，取上清所得基因组 DNA 用异丙醇沉淀，再通过乙醇漂洗等步骤得到 纯净的 DNA。 二、注意事项（实验前必须首先阅读这部分！） 1． 所有的离心步骤均在室温完成，使用离心力可以达到13,000rpm的高速 离心机。 2． 开始实验前将需要的试剂水浴先预热到 65℃备用，RNase A（10mg/ml） 请自备，TE 或者无酶水请自备。 3． 不同来源的植物组织材料中提取的DNA 的量会有差异，一般100mg新 鲜组织典型产量可达15-50μg。 4． 可以按比例放大提取的体系。 三、操作步骤 * 将 DNA 提取试剂放置在 65℃预热。 1． 加热 DNA 提取试剂到 65℃。 2． 取 50-100 mg 植物新鲜组织或 30 mg 干重组织在研钵中加入液氮充分碾 磨成细粉，或用研磨仪研磨（可以加入预热的 DNA 提取试剂研磨）。 3． 转移细粉到一个 1.5 ml 离心管中，加入 1ml~1.2ml 预热好的 DNA 提取 试剂，再加入 10 μl RNase A 剧烈涡旋振荡混匀 1 分钟，65℃水浴 30 分 钟（有些样品 10 分钟即可）。 4． 将离心管转入离心机中 13,000 rpm 室温离心 3 分钟。 下面有两种抽提方法： 无酚氯仿提取法： a． 小心吸取大约 800ul 上清到一个新的 2ml 离心管，注意不要吸到界面物  质，加入 1.2ml 异丙醇充分混匀，13,000 rpm 离心 2 分钟（板式离心机 4000g 的离心力 5min 左右也可以沉淀）。 注：吸取上清时，注意不要吸到残渣或上层漂浮物，液体量可以略小于 800ul， 但要保证吸取的液体澄清，否则会影响最终 DNA 的纯度。 b． 小心倒掉上清，注意不要倒掉沉淀，将几张吸水纸巾放置在平面上， 使离心管倒置轻压纸面，以尽可能地将残留的液体排出。加入 1ml 的 70%乙醇震荡漂洗 DNA，13,000 rpm 离心 2 分钟。 注：这步如果异丙醇没有去干净，会导致有杂质残留，影响最终纯度。 c． 小心倒掉上清，注意不要倒掉沉淀。同样用吸水纸巾尽量吸取残留液体。 保持开盖状态，室温晾 2 分钟左右使乙醇充分挥发，避免影响下游试验。 加入 100 μl TE，涡旋 5-10s 或用移液器吹打几次，使得 DNA 充分溶解。 注：如果有部分沉淀无法溶解，可以离心后取上清使用。 d． DNA 可以存放在 2-8℃,如果要长时间存放，可以放置在-20℃。 酚氯仿提取法（不推荐）： a．转移第 4 步 800ul 上清到一个新的 1.5 ml 离心管，加入等体积的酚：氯 仿：异戊醇=25：24：1 的混合液，涡旋振荡 1min，室温放置 5min。 b． 小心吸取上清到一个 2 ml 离心管，注意不要吸到界面物质，与等体积 异丙醇混合均匀，13,000 rpm 离心 2 分钟。 c. 小心倒掉上清，加入 1ml 的 70%乙醇漂洗 DNA，13,000 rpm 离心 2 分钟。 d. 重复步骤 c。 a． e. 用枪尽可能吸取多余的乙醇，室温 2 分钟左右使乙醇挥发，加入 100 μl TE, 涡旋 5-10s 或用移液器吹打几次，使得 DNA 充分溶解。 f. DNA 可以存放在 2-8℃,如果要长时间存放，可以放置在-20℃。