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产品展示
一、 试剂盒组成、储存、稳定性
1 裂解液 30ml
2 抑制物去除剂IR 50ml
3 漂洗液WB 35ml
4 DNA溶解液(或 TE) 10ml
5 磁珠 1ml
6 蛋白酶 K 20mg
7 RNase 200uL
8 溶菌酶 2.5ml
本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。
注意事项
蛋白酶 K 使用前可先短暂离心,加入 1mL 去离子水充分溶解后使用。
二、操作步骤
1、在深孔板中分别加入裂解液 600ul,平板菌(接种环刮下)、菌液离心沉淀
物或者 200uL 菌液(浓度调整至 107
-109左右),20uL 稀释后的蛋白酶 K,
4uL RNase 和 50uL 溶菌酶(10mg/ml),50°C 水浴 40 分钟,期间用移液器
吹打 3-5 次。
2、加入 20uL 磁珠,室温 10 分钟,期间吹打混合 20 下。
3、将深孔板放置到磁板上,静置 10 秒使磁珠完全沉淀,用排枪小心吸弃所
有液体(小心别吸走磁珠)
4、加入 700uL 抑制物去除剂 IR,吹打混合 20 下,放置到磁板上,静置 10 秒
使磁珠完全沉淀,用排枪小心吸弃所有液体(小心别吸走磁珠)。
5、重复步骤 4.
6、加入 700uL 漂洗液 WB,吹打混合 20 下,放置到磁板上,静置 30 秒使磁珠
完全沉淀,用排枪小心吸弃所有液体(小心别吸走磁珠)。(可以重复一次
此步骤)
7、自然晾干 2-4 分钟使磁珠上乙醇完全挥发,加入 120uL 65°预热的 DNA
溶解液或者 TE 溶解 DNA,反复吹打 20 次,也可以放置 65°水浴 3-5 分
钟以利于 DNA 洗脱,将深孔板放置磁板上,使磁珠沉底,小心吸取上清
即为所提取的 DNA,DNA 长期保存请放置于-20°C 或者-80°C。
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