1、一般我们摸索抗体的工作浓度及反应条件都是采用点杂交，只需一块很小的膜，一般我们用膜的边角料，一般直接将蛋白点在膜上即可，每次2ul 然后烘干，反复点样大约8ul 左右即可，注意点样时，用枪头尖把蛋白向四周拔下，然后直接抗体孵育显色即可，抗体稀释液一般100ul 即可，这样即节省抗体，又节省膜。

2、另说一下我们实验室孵育抗体的方法：

告诉你一种较好的节省抗体的方法，我们一般用96或24孔板的盒盖用封口膜封住作为反应板，先铺约1ml抗体稀释液，用反贴法，膜正面向下，注意不能有气泡，可用胶铲或找个干净的试管在膜上滚动去除气泡，再加0.5 覆盖足够，还可以回收约1ml ，回收后的抗体有叠氮钠加0.2%,保存于-20度，可放时间长点，我最长1月用，效果尚可，没有的话直接放在4度，一般一周内使用没问题，我们一般重复1次使用，二抗建议不要重复使用，酶太容易失效了，再说二抗很便宜，别省这点钱。但要注意，要把反应板用另一个对称的96或24孔板盖子盖好，然后保鲜膜包好，并放在湿盒以防抗体挥发。

PS：1）建议大家可去收集做MTT 实验的同学或其他人的96或24孔板的盒盖，最好找到不同牌子的板子，这样更容易找到两块可以对称盖好的盒盖

2）封口膜大约150元一卷，做反应板时只要剪一半即可，封口时双手尽量将封口膜向四周拉，然后覆盖盒盖即可，一般我封3层，怕破嘛，哈，新手肯定要多练习，我刚开始时，用老大一块膜才封好一层，现在只要四分子一块即可。